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基因扩增仪俗称PCR仪,是进行基因研究过程中必不可少的一种仪器。正是因为其特殊的工作原理,在很多的方面都有一定的应用。只要我们能想想到的与基因有关的研究都用得到PCR仪,因为有些时候我们收集到的样品是很少的,基因扩增仪,如果不通过基因扩增手段根本满足不了实验的要求。
基因扩增仪又叫PCR仪或者热梯度循环仪,基因扩增分析仪,大致可分为普通PCR仪、梯度PCR仪和定量PCR仪。而第1种不同的PCR的应用范围也有不同之处,普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录。普通的PCR和梯度PCR常见于大学的实验室中,实时荧光定量PCR仪则主要应用于医学诊断和鉴定中。
荧光定量PCR做标准曲线
1。 可能来自反转录系统。反转录反应的成分不可避免要进入PCR,基因扩增技术,但其实反转录系统中的某些成分可能抑制PCR反应。如果为了增强信号而使用多过厂商建议分量的cDNA,基因扩增pcr仪,则可能遇到此种问题。
2。 可能来自RNA样本带有的杂质。这个可以通过260/280,260/230吸收峰比值来检查。260/280需要达到1.8以上,最l好在2左右。如果样本不纯,可以考虑优化抽提步骤。
3。如果以上两个问题不存在或无法解决,就只有根据曲线的线性区间,选择可以得到线性扩增的模板用量来实验。这里面的原理是PCR inhibitor经过稀释以后作用可以减低至可以忽略。
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